出血热病毒IgM抗体检测试剂说明书
出血热病毒IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
出血热病毒IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
出血热病毒IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫法)
作者:江经理
联系call: 1991****4747****194
[原理]
本试剂盒采用亲和素-生物素化EHF核蛋白抗原预包被板EIA 原理,检测人血清/血浆中存在的EHF-IgM抗体。配以酶标记抗人IgM单克隆抗体作为标记物,加入底物TMB显色后终止反应,在450nm波长测各孔O.D值,O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统(biotin-avidin system)的稳固级联放大作用,使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂含有的独特优点。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中存在的EHF-IgM抗体。对肾病综合症出血热(HFRS)的诊断有重要的临床价值。
适应范围:
流行地区EHF病毒的诊断。
EHF病毒的流行病学调查和疫情监测。
[试剂盒组成]
1、生物素化抗原预包被板 1块(96T/48T)
2、阴性对照血清 1支(直接使用)
3、阳性对照血清 1支(直接使用)
4、标本稀释液 1瓶
5、酶结合物 1瓶(直接使用)
6、30X浓缩洗液
1瓶(20/10ml,用蒸馏水1:30稀释使用)
7、显示剂A、B液 各1瓶
8、终止液(2M H2SO4) 1瓶
9、说明书 1张
[操作步骤]
- 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封。
- 加样:将待检标本用标本稀释液1:41稀释(5ul-200ul),于反应板中加稀释好的待检标本及阴阳性对照各100ul/孔,设空白对照一孔(不加任何液体),轻拍混匀。
- 37℃温育30分钟。甩去孔内液体,用洗涤液洗板3次并拍干。
- 加酶结合物:每孔2滴,混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。
- 显色:每孔加显色剂A、B各一滴,轻拍混匀(或震荡器混匀)后置37℃10分钟。
[结果判断]
- 目测:在白色背景下观察各孔显色情况,兰色者为 阳性,无色者为阴性。
- 酶标仪测定:每孔加终止液一滴,混匀后在450nm下测定各孔O.D值。
- P/N=标本O.D值/ 阴性对照O.D值。
- P/N≥2.1为阳性;
- 1.5≤P/N<2.1为可疑标本; P/N<1.5为阴 性。
- 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。
- 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。
[注意事项]
- 微孔板须密封防潮,从冷藏环境中取出时,应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用,余者封存置2-8℃。
- 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀,滴加时保持瓶身垂直。
- 洗涤时每孔均须加满,防止孔内有游离酶不能洗净。
- 试剂置2-8℃存放,不能冻结,有效期10个月。
- 避免用溶血、混浊或脂血标本。
- 最好用新鲜标本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周(样本应避光)。