本发明涉及化合物合成领域，特别涉及3，10-二对甲氧基苯基-6，12-二氮杂四高立方烷类化合物及其合成方法、肿瘤疾病治疗药物中应用和药物组合物。
背景技术：
：：1，4-二氢吡啶(1，4-dhp)类化合物是一类重要的含氮杂环化合物，它的结构骨架广泛存在于天然产物、药物以及具有生物药物活性的分子中。其结构中特有的6π电子体系，令其表现出极其活泼的化学性质，在光诱导下能够发生[2+2]光环合、氧化和异构化等光化学反应。1，4-二氢吡啶的光化学反应产物具有良好的抗hiv和抗肿瘤等生物药理活性，如3，9-二氮杂四星烷类化合物、四氢环丁烷二吡啶类化合物及6，12-二氮杂四高立方烷类化合物等。因此，采用有机光化学的方法，对1，4-二氢吡啶衍生物的光化学反应进行系统的研究，将为其更广泛的应用研究提供理论和实验依据。据英国《柳叶刀》杂志最新数据调查研究显示，癌症(cancer)已经取代心血管疾病，成为发达国家民众的第一大死因。研究人员声称，照此趋势，癌症在未来的几十年内，将成为全球范围内的“第一大健康杀手”。2019年1月，国家癌症中心发布了一项最新数据，每年新发癌症病例约380万，死亡人数约229万，总体癌症发病率平均每年上升3.9％左右，死亡率每年保持在2.5％的增幅。平均每天超过1万人被确诊为癌症，每分钟有7.5个人被确诊为癌症。癌症已成为严重威胁中国人群健康的主要公共卫生问题之一，每年恶性肿瘤(癌症)所致的医疗花费超过2200亿，防控形势严峻。且由于全国肿瘤登记中心数据滞后三年，所以，形势比上诉还要严峻。癌症是当今世界重大疾病之一。因此合成具有抗癌活性的药物是目前药物合成领域的热点。技术实现要素：本发明的目的之一在于提供一种新的6，12-二氮杂四高立方烷类化合物。本发明的目的之二在于提供了一种新6，12-二氮杂四高立方烷类化合物的合成方法。本发明的目的之三在于提供了一种新6，12-二氮杂四高立方烷类化合物在肿瘤疾病治疗中的应用。本发明的目的之四在于提供了一种药物组合物，其含有一个新6，12-二氮杂四高立方烷类化合物。本发明是通过以下技术方案实现的：3，10-二对甲氧基苯基-6，12-二氮杂四高立方烷类化合物，具有式ⅰ所示结构如式ⅰ所示化合物的合成方法，其中，每合成式ⅰ化合物0.24g包括以下步骤：1、中间产物a的合成步骤以3-乙酰基吡啶和溴化苄为原料：3-乙酰基吡啶1.5ml溶解于乙腈25ml中，加入溴化苄1.8ml加热回流反应15h，冷却后加入乙醚30ml沉淀，抽滤后得到沉淀物，沉淀物用乙醚10ml洗涤得到吡啶溴化盐的白色粉末a。2、中间产物b的合成步骤称取1中得到的干燥吡啶溴化盐a1.5g溶解于四氢呋喃中100ml。在-18℃低温持续搅拌的状态下缓缓加入格氏试剂4-甲氧基苯基氯化镁6ml，以cui0.2g为此反应的催化剂，-18℃低温搅拌下反应20min，再转移至常温下反应30min，此过程中持续搅拌，得到产物b。3、中间产物b的纯化将2中得到的产物，旋干之后用水和二氯甲烷反复萃取三次。将萃取过的溶液旋干，按硅胶：样品＝1∶1拌样，1：10上柱。流动相使用石油醚：乙酸乙酯＝2∶1，除去反应后样品中残留的格氏试剂、cui、色素等物质。冷冻干燥后得到纯化后黄色粉末b。4、目标产物式ⅰ结构的合成称取纯化后的b0.60g作为光反应底物。将b溶解于甲醇：四氢呋喃＝1:1的混合溶剂中，置于石英试管中。放置在410nm紫外灯下照射，石英试管与光源的距离为60cm。-18℃低温反应，采用薄层色谱分析法监测反应进程。直至b的荧光点消失，表示反应完成，用时28天。5、目标产物式ⅰ结构的纯化将4中得到的反应产物的混合溶液旋干，称得重量。经硅胶柱色谱纯化后重结晶得产物。冷冻干燥后得到纯的目标化合物，经核磁及x-ray单晶衍射鉴定为式ⅰ结构，0.24g，避光保存。进一步的如权利要求1所述的化合物在肿瘤疾病治疗药物中的应用。进一步的所述肿瘤疾病药物为化疗类药物。进一步的所述肿瘤为肺肿瘤。进一步的所述肺肿瘤细胞为h1975，hcc827，a549。进一步的含有权利要求1中所示的化合物以及药效学上可接受的载体。本发明的有益效果：根据本发明的思路，对3，10-二对甲氧基苯基-6，12-二氮杂四高立方烷类化合物进行了抗肿瘤相关的药理实验。式ⅰ结构化合物的细胞毒性活性。所述的抗肿瘤阳性药物为多柔比星(doxorubicin)。选取了三种肺癌细胞h1975，hcc827，a549和两种肺正常细胞beas-2b，mrc-5，利用mtt法研究化合物对人肺癌细胞株的细胞毒性。通过比较各组ic50值揭示式ⅰ结构化合物对人肺癌细胞株的细胞毒性活性。从ic50结果可以看出，式ⅰ结构化合物其ic50值和阳性对照药物多柔比星相当。另外式ⅰ结构化合物对肺癌细胞的毒性显著高于肺正常细胞，说明式ⅰ结构的6，12-二氮杂四高立方烷类化合物具有肿瘤细胞特异性。与此相反，化疗药多柔比星对这五种细胞系均有较高的细胞毒性，其活性不具有肿瘤选择性。利用[2+2]光化学反应合成具有抗癌活性的3，10-二对甲氧基苯基-6，12-二氮杂四高立方烷类化合物，药效学评价显示其细胞毒活性明显，且对正常细胞毒性较小，具有肿瘤细胞特异性。本化合物为可用于肿瘤治疗的药物。优选的肿瘤为肺腺癌及非小细胞肺癌。附图说明图1：式ⅰ结构的3，10-二甲氧基苯基-6，12-二氮杂四高立方烷类化合物的合成路线图。具体实施方式下面的实施例及药理活性实验进一步说明本发明，但并不意味着对本发明的任何限制。实施例1：一种化合物，3，10-二对甲氧基苯基-6，12-二氮杂四高立方烷类化合物，具有式ⅰ所示结构实施例2：式ⅰ化合物合成实验结合附图1说明：以3-乙酰基吡啶和溴化苄为原料：3-乙酰基吡啶1.5ml溶解于乙腈25ml中，加入溴化苄1.8ml加热回流反应15h，冷却后加入乙醚30ml沉淀，抽滤后得到沉淀物，沉淀物用乙醚10ml洗涤得到吡啶溴化盐的白色粉末a：3.59g，产率90.0％(产率误差范围不超过5％为正常)。称取得到的干燥的吡啶溴化盐a1.5g溶解于四氢呋喃中100ml。在-18℃低温持续搅拌的状态下缓缓加入格氏试剂4-对甲氧基苯基氯化镁6ml，以cui0.2g为此反应的催化剂，-18℃低温搅拌下反应20min，再转移至常温下反应30min，此过程中持续搅拌，直到反应完成，得到产物b。将得到的产物纯化后除去反应后样品中残留的格氏试剂、cui、色素等物质，得1.29g，产率78.7％(产率误差范围不超过5％为正常)，称取0.60g纯化后b作为光反应底物。使其溶解于甲醇：四氢呋喃＝1:1的混合溶剂中，置于石英试管中。放置在410nm紫外灯下照射，石英试管与光源的距离为60cm，-18℃低温反应，采用薄层色谱分析法监测反应进程。直至b的荧光点消失，表示反应完成，用时28天。将所得产物经纯化后冷冻干燥后得到纯的目标化合物0.24g，经核磁及x-ray单晶衍射鉴定为式ⅰ结构，避光保存。式ⅰ结构的3，10-二对甲氧基苯基-6，12-二氮杂四高立方烷类化合物的理化、波谱数据如下：白色粉末，esi-msm/z639[m+h]+。分子式为c42h42n2o4。1h-nmr(cdcl3,600mhz)δh:2.10(s,6h,-me×2),3.19(brs,2h,h-1,5),3.33(brs,4h,h-3,10,4,11),3.54(d,2h,j＝12hz,h-7,8),3.59(brs,2h,ph-ch2-n-,空间远cl端),3.82(s,6h,-ome×2),5.06(s,2h,ph-ch2-n-,空间近cl端)；以下低场区信号峰为4个苯环上的氢原子信号峰，6.39(d,4h,j＝6hz),6.82(d,4h,j＝12hz),7.02(m,8h),7.10(m,2h)。13c-nmr(cdcl3,150mhz)δc:211.9(羰基×2),157.2(苯上与甲氧基相连的碳×2),138.3(单取代苯上的季碳×2),133.4(苯环上与甲氧基对位的碳×2)；128.7(c×4),128.6(c×4),127.9(c×2)为两个单取代苯环上的碳原子；126.8(c×4),113.4(c×4)为两个对位双取代苯上的碳原子；70.4(c-1,5),70.2(c-7,8),67.8(c-ph-ch2-n-×2),55.8(c-2,9),55.5(-ome×2),49.4(c-3,10),45.8(c-4,11),27.0(-me×2)。药理实验试验材料1、受试药：本发明单体化合物。2、阳性对照药：多柔比星，由中国食品药品检定研究院提供。hplc检测纯度>98％。3、细胞：人肺癌细胞株h1975，hcc827，a549和两种正常人肺上皮细胞beas-2b，mrc-5均购自美国标准生物品收藏中心(atcc)。4、培养基：10％小牛血清及双抗的rpmi1640培养液，美国gibco公司生产。用含10％小牛血清的rpmi1640培养基配制成1×104cell/ml细胞悬液,于96孔培养板内接种,每孔100μl(含1000个肿瘤细胞),置37℃,5％co2温箱内培养24h后加药,实验设空白对照,受试样品设3个浓度(0.1,1,10μg/ml),每浓度3个平行孔,置37℃,5％co2温箱内培养4天。弃去培养液,每孔加入mtt溶液(0.4mg/ml,rpmi1640配制)100μl,37℃孵育4h。弃上清液,每孔加入dmso150μl,溶解fomazan颗粒,轻度振荡后,用550型酶标仪在检测波长540nm,参考波长405nm下测定od值。结果计算：以药物的不同浓度对细胞的抑制率作图可得到剂量反应曲线,从中求出半数抑制浓度(ic50)。相同条件下的doxorubicin为阳性对照。table式ⅰ结构化合物的细胞毒活性据数据分析，该化合物对于三种肿瘤细胞的毒活性与阳性对照药多柔比星相仿，但对正常细胞毒性较小，说明该类化合物具有肿瘤细胞特异性。通过以上细胞毒活性实验显示,该类3，10-二对甲氧基苯基-6，12-二氮杂四高立方烷类化合物在肿瘤治疗中有一定的研究意义,对于癌症的治疗有一定的开发前景，可以进一步开发为潜在的抗癌药物。实施例3：本发明还涉及以本发明化合物作为活性成分的药物组合物。该药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过将本发明化合物与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅剂结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。本发明化合物在其药物组合物中的含量通常为0.1-95重量％。本发明的化合物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜、直肠等。给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。本发明的化合物可以制成普通制剂、也可以是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。为了将本发明化合物制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等；粘合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分本发明化合物与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分本发明化合物先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备本发明化合物片剂的各稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备本发明化合物的胶囊剂。为将本发明化合物制成注射剂，可以用水、乙醇、异丙醇、丙二醇或它们的混合物作溶剂并加入适量本领域常用的增溶剂、助溶剂、ph调剂剂、渗透压调节剂。增溶剂或助溶剂可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羟丙基-β-环糊精等；ph调剂剂可以是磷酸盐、醋酸盐、盐酸、氢氧化钠等；渗透压调节剂可以是氯化钠、甘露醇、葡萄糖、磷酸盐、醋酸盐等。如制备冻干粉针剂，还可加入甘露醇、葡萄糖等作为支撑剂。此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。本发明化合物药物组合物的给药剂量依照所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的个体情况，给药途径和剂型等可以有大范围的变化。一般来讲，本发明化合物的每天的合适剂量范围为0.001-150mg/kg体重，优选为0.1-100mg/kg体重，更优选为1-60mg/kg体重，最优选为2-30mg/kg体重。上述剂量可以一个剂量单位或分成几个剂量单位给药，这取决于医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。本发明的化合物或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用。当本发明的化合物与其它治疗药物存在协同作用时，应根据实际情况调整它的剂量。当前第1页12当前第1页12