干细胞marker大全指南!
作为生命的种子,干细胞在生物界叱咤风云已久,是目前公认最有前途的“仔”。从“多利”绵羊的诞生,到诱导性多能干细胞(iPSC)的发现。再到现如今,无论是疾病模型,细胞治疗还是器官移植再生医学方面的突飞猛进,都让我们始终相信干细胞治疗的愿景终将实现。
诱导性多能干细胞和胚胎干细胞
当然,突飞猛进的现况,离不开基础和临床研究这些星星之火。Invitrogen提供高质量的干细胞标志物抗体,适用于对干细胞进行多参数免疫分型;还有经过严格两步法测试的高级验证抗体“”,结果更稳定准确。
多能干细胞(PSC)标志物
为了维持细胞的干性,iPSC和胚胎干细胞(ESC)均需要表达关键转录因子,如Nanog和OCT4,它们会调节细胞分裂、分化和发育至关重要的基因。此外,通常PSC还会表达一组特定的细胞表面蛋白(如TRA-1-60、TRA-1-81、SSEA3和SSEA4)。
对这些标志物的检测是鉴定iPSC和ESC的第一步。一般使用抗体对这些多能性marker进行免疫荧光染色。
左:DyLight 488标记的抗SSEA5(货号MA1-144-D488,绿色)和DyLight 650标记的抗SSEA4(货号MA1-021-D650,红色)。中:DyLight 488标记的抗Lin28(MA1-016-D488)。右:DyLight 650标记的抗Sox20 (MA1-014-D650)。细胞核DNA使用Invitrogen DAPI(货号D1306)。
表1. 常用多能干细胞标志物的抗体
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三胚层细胞标志物
是否能分化为外胚层、中胚层和内胚层也是检验PSC细胞多能性的关键标准。通过免疫荧光来检测这些标记物,不仅可以看到不同标记物在不同细胞系中的表达,还可以看到它们在细胞的具体定位,使鉴定结果更加精准。
表2. 常用三胚层干细胞标志物的抗体
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间充质干细胞(MSC)标志物
MSC是多潜能干细胞,可以分化成许多细胞类型,包括骨骼、脂肪、软骨、肌肉和皮肤。它在治疗各种疾病(比如心血管疾病和克罗恩病)的潜在可能是目前干细胞研究的一个热门课题。根据国际细胞治疗协会(ISCT)提出的基于体外培养细胞特征的标准,请参考以下鉴定MSC标志物:
表3. 间充质干细胞标志物
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造血干细胞(HSC)标志物
HSC是多潜能细胞,可以生成血液里包括B/T细胞、NK、DC、单核细胞、血小板和红细胞的所有细胞。HSC非常小并且是非贴壁细胞,这使得它们很难纯化或通过显微镜观察。因此,通常用流式细胞术鉴定HSC表面抗原,一般要用10至14个抗体配色组合。重编程技术和人PSC的造血分化的最新进展为研究造血发育和模拟血液疾病创造了全新的机会。
表4. 代表性造血干细胞标志物
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神经干细胞标志物
多能干细胞能分化成神经谱系细胞,包括神经干细胞、胶质细胞、星形胶质细胞、少突细胞和神经元。
神经干细胞的分化路径
表5. 神经干细胞、胶质细胞和神经元标志物
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胰脏和心血管谱系的常见标志物
多能干细胞的主要应用之一是细胞治疗。目前,PSC来源的可移植肝脏和β细胞在患者治疗方面拥有广阔的前景。其涉及到的细胞标记物包括:
表6. 胰腺和肝脏细胞系标志物
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选完一抗,优质的二抗同等重要。以下为您推荐适用于IF/ICC/IHC/WB等多种应用的Invitrogen热门二抗:
表7. 热销HRP和荧光二抗
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文章来源于: 赛默飞生命科学
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