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实验原理
CRISPR/Cas9为新型的基因组编辑技术,拥有操作简单,效率高,特异性强,以及作用靶点多等优势,逐渐成为基因敲除的标准操作工具。目前,CRISPR/Cas9系统已经广泛用于对哺乳动物细胞,细菌,斑马鱼,小鼠,猪,猴的基因编辑。其基本原理图如下:
此系统的工作原理是通过人工优化的具有引导作用的单链gRNA(Guide RNA)引导核酸酶Cas9在与gRNA配对的靶位点处剪切双链DNA,引起DNA双链断裂。生物体在利用非同源末端修复机制(NHEJ)或同源重组机制(HR)修复DNA时,产生移码突变、替换或删除,致使基因功能丧失。
技术流程
公司提供
实验报告(含基本步骤、电泳结果、测序结果和酶切鉴定)
质粒
菌株
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